KTS-01/KlenTaq-S 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

貨號(hào)：KTS-01

產(chǎn)品描述：KlenTaq-S（Taq DNA聚合酶）

品牌：ScienTech 

應(yīng)用：

KlenTaq -S和PAP反應(yīng)。

許多研究小組在PAP反應(yīng)中發(fā)現(xiàn)KlenTaq- S是一種合適的熱穩(wěn)定 Taq DNA聚合酶。 

klentaq-s由編碼Thermus aquaticus DNA聚合酶的，5’端缺失和F667Y（Tabor和Richardson）突變的基因表達(dá)的酶。在酶反應(yīng)緩沖液中反復(fù)暴露于胞外，酶沒(méi)有顯示明顯的活性丟失。

KlenTaq - S濃度：       10 U /μl

PAP（焦磷酸分解活化聚合）/ KlenTaq- S：

PAP在焦磷酸水解 和使用3’封閉引物與DNA聚合酶偶聯(lián)聚合過(guò)程中，*的DNA擴(kuò)增方法（Liu和Sommer：BioTechniques，29 [2000]，1072-1080; Nucleic Acids Res，30 [2002]，598-604）。  焦磷酸水解是DNA聚合的逆反應(yīng)，其中在無(wú)機(jī)焦磷酸存在下，通過(guò)酶除去引物模板雙鏈體3'末端處的封閉核苷酸（通常是雙脫氧基）。通過(guò)焦磷酸水解除去封閉的核苷酸后，活化的引物可通過(guò)DNA聚合而延長(zhǎng)。

由于PAP 的高特異性（1/3× ^{10 11}） ，該過(guò)程正成為檢測(cè) 存在大量過(guò)量的野生型等位基因時(shí)的罕見(jiàn)突變，大雜合缺失，基因重復(fù)等的有力工具（Liu等人：Biotechniques，40 [2006]，661-668）。理論上，PAP可以檢測(cè)野生型等位基因3× ^{10 11個(gè)}拷貝中的單個(gè)堿基突變。

PAP可以被用來(lái)作為一種替代或證實(shí)的實(shí)時(shí)PCR （Boon等人： Prenat   DIAGN 27 [2007]，932-937）方法。

PAP反應(yīng)建議：

50mM Tris-HCl、7.8，16mM 硫酸銨，3.5mM氯化鎂，25µM每種dNTPs，0.1µM每個(gè)引物，5-200 ng模板，90µm無(wú)機(jī)焦磷酸，2%二甲基亞砜（DMSO），2.5U klentaq-s酶。

循環(huán)條件：

95⁰C for 1 min (變性), 然后 

94⁰C for 15 sec

60⁰C for 30 sec

64⁰C for 30 sec

68⁰C for 1 min

72⁰C for 1-2 min      

共 25-45 個(gè)循環(huán)

緩沖液  (10X PR1):

500 mM Tris-HCl, pH 7.8, 160 mM  (NH₄)₂SO₄, 35 mM MgCl₂, 1.5 mg/ml BSA

訂購(gòu)信息：

貨號(hào)：KTS-01

規(guī)格：100 µl or 1000 U/vial

產(chǎn)品鏈接：http://www.scientechcorp。。ｎｅｔ/c_klentaqs.php

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