ArcticZymes SAN HQ 運(yùn)用案例

 ArcticZymes的業(yè)務(wù)開(kāi)發(fā)Andrew Ward在“ Genetic Engineering & Biotechnology News”上發(fā)表了一篇文章《Exploring a New Enzymatic Tool for AAV Production》，   詳細(xì)介紹了 在AAV生產(chǎn)中使用ArcticZymes的  SAN HQ。

   文中提到關(guān)于SAN的使用，不僅通過(guò)鹽的增加和對(duì)病毒生產(chǎn)的影響來(lái)實(shí)現(xiàn)效率，而且通過(guò)使用兼容的生物化學(xué)品來(lái)簡(jiǎn)化工作流程。也有人認(rèn)為通過(guò)消化蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA可以達(dá)到效率。在zui近一項(xiàng)關(guān)于保密合作者（內(nèi)部公司數(shù)據(jù)）的研究中，已經(jīng)證明耐鹽核酸酶能夠消化組蛋白結(jié)合的DNA并結(jié)合更高的鹽水平，從而更有效地消化殘余的DNA。

  且用于咨詢新型工具和生物處理解決方案供應(yīng)商的時(shí)間和精力通常可以在實(shí)現(xiàn)流程效率后進(jìn)行合理化。在SAN的情況下，生物處理操作所需的酶量顯著減少導(dǎo)致顯著的成本節(jié)約，不僅通過(guò)降低投入成本，而且由于處理產(chǎn)品相關(guān)成本的降低。

概觀

        SAN High Quality (Bioprocessing grade)是在制造和生物處理工作流程中去除核酸的解決方案。這種非特異性重組內(nèi)切核酸酶在高鹽濃度下具有良好活性，這可以提高各種工作流程的效率和產(chǎn)量。

        鹽是各種凈化方案的重要組成部分。鹽的存在可以zui小化聚集，提高目標(biāo)溶解度并提高目標(biāo)產(chǎn)量。高鹽能夠污染DNA從相關(guān)蛋白中解離出來(lái)，并可以降解。SAN高品質(zhì)與使用高鹽條件高度兼容。

The main advantages of SAN High Quality

SAN High Quality的主要優(yōu)勢(shì)

• 高純度（≥98％）
• 沒(méi)有檢測(cè)到蛋白酶
• 在低溫下有效
• 高鹽條件下活性高
• 提供擴(kuò)展的產(chǎn)品文檔
• 與SAN HQ ELISA兼容
•  

屬性

• 來(lái)源： 在巴斯德畢赤酵母中重組生產(chǎn)
• 比活度：  ≥175000單位/ mg
• 大小：  蛋白質(zhì)糖基化。沒(méi)有糖基化的蛋白質(zhì)大小是26kDa
• 單位定義：  一個(gè)單位定義為37℃下30分鐘內(nèi)在260nm處吸光度增加1分鐘，使用50μg/ ml小牛胸腺DNA在由25mM Tris-HCl，pH8.5（25°）組成的緩沖液中C），5毫摩爾MgCl 2，500mM NaCl的
• 特異性：  非特異性內(nèi)切酶切割單鏈和雙鏈DNA和RNA。該酶以10：1的比例降解DNA與RNA
• 終產(chǎn)物：  在*降解后，終產(chǎn)物由大部分5個(gè)核苷酸的寡核苷酸組成
• 活動(dòng)：
  • Tmp：0-40°C，適宜35°C
  • NaCl：50mM-1M，適宜NaCl為0.5M
  • 活性需要Mg 2 +（> 1 mM），適宜Mg 2+為20 mM
  • pH值：7.0-9.5，適宜pH值為9
• 對(duì)典型緩沖添加劑的耐受性：
  • 咪唑：在350mM咪唑中20％的活性
  • 甘油：35％甘油時(shí)20％的活性
  • Triton X-100：不降低活性（測(cè)試達(dá)15％）
  • SDS：不推薦
  • 尿素：不推薦
  • 還原劑（如DTT，TCEP）：會(huì)導(dǎo)致失活

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