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            Favorgen FABGK000-Maxi說明書

            更新時間:2018-10-10      點擊次數:2478

            Favorgen  FABGK000-Maxi說明書

            Favorgen位于中國臺灣國家生物技術園區。它通過自動化系統建立了ISO合格工廠,
            生產高質量的分子生物學產品和臨床化學試劑。目前,Favorgen在美國,中國,韓國和丹麥設立分支機構,并在30多個國家設立了分銷網絡。自成立以來,Favorgen已經在其先進的生產設施上投入了大量資金,以競爭力的價格為客戶提供高質量的產品。Favorgen致力于通過與學術和行業合作伙伴的內部和合作開展研究,以不斷提供高質量的創新產品。

             

             

            Nucleic-acids extraction Genomic DNA Extraction

            核酸提取基因組DNA提取

             

            Favorgen  FABGK000-Maxi說明書

             

            FavorPrepTM Blood / Cultured Cell Genomic DNA Extraction Maxi Kit

            (For Research Use Only)

             

            Cat. No.

            / preps

            FABGK000-Maxi

            (2 preps)

            FABGK003

            (10 preps)

            FABGK003-1

            (24 preps)

             

             

            Proteinase K powder+ 11 mg x 2 11 mg x 10 11 mg x 24

            FABG Buffer 22 ml 110 ml 265 ml

            W1 Buffer* (concentrated) 6.5 ml 33 ml 88 ml

            Wash Buffer** (concentrated) 3 ml 20 ml 40 ml

            Elution Buffer 6 ml 30 ml 60 ml

            FABG Maxi Column 2 pcs 10 pcs 24 pcs

            Elution Tube (50 ml tube) 2 pcs 10 pcs 24 pcs

            User Manual 1 1 1

            Preparation of ProteinaseK solution (20mg/ml) and Wash Buffer for first use:

            Cat. No:

            FABGK000-Maxi

            (2 preps)

            FABGK003

            (10 preps)

            FABGK003-1

            (24 preps)

            + ddH2O volume for Proteinase K

            0.5 ml

            * ethanol volume for Wash Buffer W1

            2.5 ml

            12 ml

            32 ml

            **ethanol volume for Wash Buffer W2

            12 ml

            80 ml

            160 ml

             

             

             

             

             

            規格:

             

            原理:自旋柱(硅膠膜)

             

            樣本大?。盒迈r/冷凍血液10毫升;培養細胞1×10 8

             

            柱容量:500微克DNA

             

            平均DNA產量:35g/1ml全血處理時間:1小時

             

            洗脫體積:0.75~1.5ml

             

            需由用戶提供的材料

             

            吸管和管尖

             

            離心機:應能產生4,000克熱孵化器的力

             

            烘箱(可選)乙醇(96%~100%)渦旋

             

            重要說明:

             

            本系統中提供的緩沖區包含刺激物。在處理這些緩沖器時,戴上手套和實驗室外套。

             

            手術前將熱孵化器預熱至60°C。

             

            在所有的離心步驟中,使用帶有擺動桶轉子的離心機和4,000~6,000克的力。

             

            將500升無菌的ddH2O加入到延長K管中,制成22毫克/毫升的原液。確定蛋白酶K粉已*溶解。將庫存溶液存放在4°C。

             

            為步驟11(釋放步驟)過熱釋放緩沖器或ddH2O。

             

            血液DNA提取協議

             

            在開始以下步驟之前,請閱讀重要說明。

             

            將多達10毫升的樣本(全血、布菲大衣)轉移到50毫升離心管(未提供)。

             

            --如果樣品體積小于10mL,則加入PBS使體積達到10mL。

             

            在樣品中加入500升蛋白酶K(20 mg/ml),用旋渦法攪拌均勻。在樣品混合物中加入10毫升的光纖光柵緩沖液。通過脈沖旋渦充分混合.

             

            -不要直接將蛋白酶K添加到FABG緩沖液中。

             

            將樣品混合物在60℃下孵育15分鐘,以使樣品分離。在孵化過程中,每3-5分鐘倒置一次.

             

            (可選):如果需要無RNA的基因組DNA,在樣品混合物中加入80毫升100毫克/毫升的核糖核酸酶A(未提供),在室溫下孵育10分鐘。

             

            在樣品中加入10 ml乙醇(96~100%)。通過漩渦充分混合。如果出現沉淀物,就用噴入的方法打破它。

             

            將FABG Maxi柱放置在50毫升離心管上(未提供)。并將15毫升的樣品混合物(添加乙醇)(包括任何沉淀物)仔細轉移到FABG Maxi柱。關上蓋子 4,000~6,000×g離心3 min。

             

             

            英語字母表的第22個字母 1115

             

            丟棄流道,將剩余的樣品混合物轉移到相同的FABG Maxi柱上.關閉蓋和離心機在4,000~6,000 x g,3分鐘,并丟棄流過.

             

            8在FABG Maxi柱上加入4ml W1緩沖液(乙醇加乙醇)。關閉蓋子,在4,000~6,000×g離心3 min。丟棄流道,將fbg maxi柱放回50毫升。 離心管。

             

            -確保乙醇在次打開時已加入W1緩沖液。

             

            在FABG Maxi柱上加入7毫升的洗滌緩沖液(加入乙醇)。關閉蓋子,在4,000~6,000×g離心15 min。丟棄流道,將fbg maxi柱放回50毫升。 離心管。

             

            --在次打開時,確保已將乙醇添加到清洗緩沖液中。

             

            -重要的一步!確保離心后殘余液體被*除去??赡苄枰?0°C的真空烘箱中繼續干燥3英里。 lutes[人名] 盧茨

             

            將FABG Maxi柱放入新的50毫升離心管中。(洗脫管,提供)

             

            FABG Maxi柱膜中心加入0.75~1.5ml預熱洗脫緩沖液或ddH2O(pH7.5-9.0)。將FABG馬溪柱在室溫下放置5 min。

             

            -重要的一步!若要進行有效洗脫,需在FABG Maxi柱上放置5分鐘,以確保洗脫緩沖液被柱膜*吸收。

             

            -標準體積為0.75~1.5ml。如果需要更高的DNA產量,重復DNA排出步驟(步驟11),以提高DNA恢復。

             

            4,000×g離心2分鐘,以逃避總DNA。

             

            程序:(用于培養細胞DNA的提取)

             

            將多達1x108個細胞轉移到50毫升離心管(未提供)。4,000~6,000 x g離心5 min,使細胞顆粒化。(如果使用貼壁細胞,則在Harv之前將細胞胰蛋白酶化。 besting1。[口]打敗,勝過( best的現在分詞 )

             

            用10毫升PBS刺激細胞。

             

            從第4步開始遵循血液協議。

             

             

            發現并修理故障,解決紛爭

            Possible reasons

            Solutions

            Low or no yield of genomic DNA

            Poor cell lysis

            Poor cell lysis because of insufficient Proteinase K activity

            Repeat the extraction procedure with a new sample. Use a fresh

            or well-stored Proteinase K stock solution.

            Poor cell lysis because of insufficient mixing with FABG buffer

            Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the sample and FAGB Buffer immediately and thoroughly by pulse-vortexing.

            Poor cell lysis because of insufficient incubation time

            Repeat the extraction procedure with a new sample. Extend the incubation time and make sure that no residual particulates remain.

            Ethanol is not added into the lysate before transfer- ring into FAGB Maxi Column

            Repeat the extraction procedure with a new sample.

            Incorrect preparation of Wash Buffer

            Ethanol is not added into W1 and Wash Buffer when first

            Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample.

            The volume or the percent- age of ethanol is not correct before adding into W1 and Wash Buffer

            Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample.

             

            Possible reasons

            Solutions

            Elution of genomic DNA is not efficient

            pH of water elution is acidic

            (ddH2O)

            for

            Make sure the pH between 7.5- 9.0.

            of ddH2O

            is

            Use Elution Buffer elution.

            (provided)

            for

            Elution Buffer or ddH2O is not completely absorbed by column membrane

            After Elution Buffer or ddH2O is added, stand the FAGB Maxi Column for 5 min before centrifuga-

            Column is clogged

            Blood sample contains clots

            Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the blood sample well with anti-coagulant to prevent formation of blood clots.

            Sample is too viscous

            Reduce the sample volume.

            Degradation of elutated DNA

            Sample is old

            Always use fresh or well-stored sample for genomic DNA extraction.

            Buffer for gel electrophoresis contaminated with DNase

            Use fresh running buffer for gel electrophoresis.

             

             

             

            基因組DNA提取血液DNA Mini / Midi / Maxi試劑盒

            FABGK 000

            FavorPrep™血液/培養細胞基因組DNA提取迷你試劑盒

            4個準備。

            蛋白酶K粉末
            FATL緩沖液
            FABG緩沖液
            W1緩沖液
            洗滌緩沖液(濃)
            洗脫緩沖液
            FABG迷你柱
            2ml收集管
            1.5ml洗脫管

            在室溫(15~25℃)下保存2年。
            除蛋白酶K粉外,貯存于4℃。

            FABGK 001

            50個準備。

            FABGK 001-1

            100個準備。

            FABGK 001-2

            300個準備。

            FABGK 100

            FavorPrep™血液/培養細胞基因組DNA提取迷你試劑盒

            100個準備。

            RBC裂解緩沖液 FATL緩沖液 FABG緩沖液 W1緩沖液 洗滌緩沖液(濃) 洗脫緩沖液FABG迷你柱 2ml收集管 




             

            在室溫(15~25℃)下保存2年。
            除蛋白酶K粉外,貯存于4℃。

            FABGK 300

            300個準備。

             

             

            FABGK 002-S

            FavorPrep血液/培養細胞基因組DNA提取Midi試劑盒

            2個準備。

            蛋白酶K粉末
            FABG緩沖液
            洗滌緩沖液W1(濃)
            洗滌緩沖液W2(濃)
            洗脫緩沖液
            FABG Midi柱
            15 ml洗脫管

            在室溫(15~25℃)下保存2年。

            除蛋白酶K粉外,貯存于4℃。

            FABGK 002

            20個準備。

            FABGK000-MAXI

            FavorPrep™血液/培養細胞基因組DNA提取Maxi試劑盒

            2個準備。

            Proteinase K Powder 
            FABG Buffer 
            W1 Buffer 
            Wash Buffer(濃)
            洗脫緩沖液
            FABG Maxi Columns 
            50 ml Elution tubes

            在室溫(15~25℃)下保存2年。
            除蛋白酶K粉外,貯存于4℃。

             

             

             

             

             

             

             

             

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