SolubleBioScience一直在為工業(yè)解決溶解度和穩(wěn)定性問題。

我們?yōu)橹扑幒蜕锛夹g(shù)行業(yè)提供支持

·  優(yōu)化蛋白質(zhì)配方的服務(wù)

·  產(chǎn)品套件，提供溶解度和穩(wěn)定性參數(shù)的早期解決方案評(píng)估

·  可以為希望在內(nèi)部引入HSC技術(shù)的客戶購買儀器

許多蛋白質(zhì)不是非常易溶或穩(wěn)定，特別是在研究，治療，疫苗，科學(xué)試劑和工業(yè)酶通常需要的高濃度下。保持蛋白質(zhì)可溶和穩(wěn)定，直到它們準(zhǔn)備好使用，是制造商和研究人員定期面臨的艱巨挑戰(zhàn)。蛋白質(zhì)在純化和配方優(yōu)化過程中經(jīng)常顯示出不需要的聚集，這可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)活性的變化和配方團(tuán)隊(duì)必須在過程早期解決的更高的免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。

與傳統(tǒng)方法相比，SolubleBioScience提供的結(jié)果可以在更短的時(shí)間內(nèi)以更低的成本促進(jìn)蛋白質(zhì)基制劑的溶解性和穩(wěn)定性。

SolubleBioScience OptiSol蛋白質(zhì)溶解度篩選試劑盒

OptiSol蛋白質(zhì)溶解度篩選試劑盒

根據(jù)蛋白質(zhì)分子的預(yù)期分子量選擇濾板。

描述

OptiSol™蛋白質(zhì)溶解度試劑盒可幫助研究人員識(shí)別保護(hù)目標(biāo)蛋白免于聚集或溶解聚集蛋白樣品的配方。

OptiSol蛋白質(zhì)增溶篩選試劑盒包含一系列不同的緩沖液（pH 3至pH 10）和一系列溶解度增強(qiáng)劑（鹽，氨基酸，糖類，多元醇，還原劑），可以確定特定蛋白質(zhì)的條件樣本受到保護(hù)以免聚合或可以解除聚合。可以在一個(gè)單一的無標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中測(cè)試總共90種具有溶解度增強(qiáng)劑的不同配方; 剩下的6個(gè)實(shí)驗(yàn)是陽性和陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)。下表列出了OptiSol試劑盒中的所有試劑。

為何選擇OPTISOL？

找到蛋白質(zhì)的溶解度點(diǎn)

OptiSol™蛋白質(zhì)溶解度試劑盒可幫助研究人員識(shí)別保護(hù)目標(biāo)蛋白免于聚集或溶解聚集蛋白樣品的配方。

•  快速評(píng)估聚合行為與pH，鹽和添加劑的關(guān)系
•  分析90多種不同條件并且無標(biāo)記
•  簡(jiǎn)單的混合和旋轉(zhuǎn)方案，無需超速離心
•  有機(jī)會(huì)拯救可逆聚集的蛋白質(zhì)樣本
•  保護(hù)蛋白質(zhì)免受壓力下的聚集*
•  使用Protein Dashboard快速查找趨勢(shì)

蛋白質(zhì)聚集，這種不希望的過程通常由升高的溫度，劇烈攪拌，添加配體或分子結(jié)合配偶體或僅僅通過在一段時(shí)間內(nèi)儲(chǔ)存蛋白質(zhì)樣品引起。通過適當(dāng)選擇pH，鹽或穩(wěn)定添加劑，通常可以避免蛋白質(zhì)聚集。這種OptiSol蛋白質(zhì)增溶篩選試劑盒包含一系列不同的緩沖液（pH 3至pH 10）和一系列溶解度增強(qiáng)劑（鹽，氨基酸，糖類，多元醇，還原劑），可以確定特定的條件。保護(hù)蛋白質(zhì)樣品免于聚集或可以解聚集。可以在一個(gè)單一的無標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中測(cè)試總共90種具有溶解度增強(qiáng)劑的不同配方; 剩下的6個(gè)實(shí)驗(yàn)是陽性和陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

可溶性蛋白質(zhì)通過過濾器，聚合蛋白質(zhì)不通過。這個(gè)簡(jiǎn)單的特征在過濾步驟中被利用。含有可溶性蛋白質(zhì)的孔在過濾過程后會(huì)產(chǎn)生蛋白質(zhì); 蛋白質(zhì)聚集體不含任何蛋白質(zhì)。

運(yùn)行蛋白質(zhì)增溶試劑盒后，您已經(jīng)確定了將蛋白質(zhì)靶標(biāo)保持在溶液中的條件，并且您知道蛋白質(zhì)聚集的條件。然后選擇條件以獲得“表現(xiàn)良好的蛋白質(zhì)”。

•  比傳統(tǒng)的試錯(cuò)法測(cè)試更好，更快（不到1小時(shí)）
•  對(duì)于每個(gè)蛋白質(zhì)溶解度數(shù)據(jù)點(diǎn)，低蛋白質(zhì)消耗消耗少于10uL。蛋白質(zhì)量需要與您的目標(biāo)檢測(cè)分析相匹配
•  方便：一次性獲得大量蛋白質(zhì)溶解信息。利用您自己選擇的目標(biāo)特異性檢測(cè)。OptiSol蛋白質(zhì)溶解度篩選試劑盒與許多功能分析，SDS-PAGE，蛋白質(zhì)印跡，質(zhì)譜分析和基于熒光的蛋白質(zhì)檢測(cè)兼容。

應(yīng)用

蛋白質(zhì)溶解度篩選試劑盒OptiSol™的應(yīng)用

OptiSol™蛋白質(zhì)溶解度篩選試劑盒可用于保護(hù)目標(biāo)蛋白質(zhì)免受各種聚集誘導(dǎo)應(yīng)激。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液反復(fù)冷凍和解凍時(shí)，或者當(dāng)液體暴露于高剪切力或強(qiáng)光下時(shí)，蛋白質(zhì)在暴露于高溫時(shí)，當(dāng)它們被儲(chǔ)存較長(zhǎng)時(shí)間時(shí)，通常會(huì)聚集。空氣氧化，反應(yīng)試劑或表面暴露提供了蛋白質(zhì)聚集的進(jìn)一步來源。

這些應(yīng)激物可用于評(píng)估特定蛋白質(zhì)樣品的易感性并鑒定保護(hù)劑。

如果你的挑戰(zhàn)是 -

•  不希望的抗體或蛋白質(zhì)聚集
•  從純化柱洗脫過程中蛋白質(zhì)的可逆沉淀
•  中性pH值下的不溶性蛋白質(zhì)

如果你需要 -

•  篩選不同的緩沖液，以保持蛋白質(zhì)在高濃度下穩(wěn)定
•  保持抗原可溶，同時(shí)從緩沖液中去除某些成分
•  將結(jié)合的抗原 - 抗體復(fù)合物分離成未結(jié)合的形式
•  找到純化后蛋白質(zhì)長(zhǎng)期穩(wěn)定性的宜條件。
•  優(yōu)化凈化條件

技術(shù)

這是OPTISOL KITS的工作原理：

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新的FASOS技術(shù)

OptiSol基于專有的FASOS技術(shù)。FASOS代表Filter Aided SolubilityOptimization Screening。將蛋白質(zhì)溶液與許多不同的溶液分開混合，僅檢測(cè)通過分子量截止濾器（MWCO 30或MWCO 200）的那些蛋白質(zhì)溶液。這種組合溶液和過濾方法確定了保持樣品溶解的宜p??H，鹽，緩沖液類型，添加劑和抗氧化劑。溶解聚集的蛋白質(zhì)溶液（應(yīng)用A）或選擇特定的樣品應(yīng)激（加熱，凍融，儲(chǔ)存，剪切等），并確定那些使蛋白質(zhì)樣品溶解而不會(huì)聚集的溶液。Protein Dashboard支持?jǐn)?shù)據(jù)評(píng)估。

應(yīng)用A：蛋白質(zhì)溶解度分析
應(yīng)用B：蛋白質(zhì)聚集體增溶

如何-OPTISOL - 作品 - 應(yīng)用 - 一個(gè)

如何-OPTISOL-工程應(yīng)用-B

需要多少蛋白質(zhì)？

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液與制劑混合時(shí)，蛋白質(zhì)濃度將在反應(yīng)板中稀釋11倍（15μL/165μL）。因此，必須從儲(chǔ)備蛋白質(zhì)溶液開始，該溶液是反應(yīng)板中終溶液濃度的11倍。約2 mL蛋白質(zhì)原液就足夠了。所需的蛋白質(zhì)濃度取決于蛋白質(zhì)的消光系數(shù)和蛋白質(zhì)檢測(cè)測(cè)定的靈敏度。在我們的實(shí)驗(yàn)室中，我們使用半寬UV 96孔板和UV / vis板讀數(shù)器開發(fā)了UV280方法。在我們的例子中，半寬UV280孔中的UV280吸光度必須至少約為0.4（吸光度單位）。

數(shù)據(jù)分析

使用蛋白質(zhì)儀表板輕松進(jìn)行數(shù)據(jù)分析

與OptiSol蛋白質(zhì)溶解度篩選試劑盒一起提供Protein Dashboard™。這種新工具有助于發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)行為趨勢(shì)，并確定宜蛋白質(zhì)溶解的關(guān)鍵溶劑因子。

Protein Dashboard™有助于發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)行為趨勢(shì)，并在單個(gè)實(shí)驗(yàn)中確定宜蛋白質(zhì)溶解的關(guān)鍵溶劑因子。只需將輸出數(shù)據(jù)剪切并粘貼到基于Excel的蛋白質(zhì)儀表板中，即可查看目標(biāo)蛋白質(zhì)行為。

OptiSol™蛋白質(zhì)溶解度篩選試劑盒可用于四種不同大小的蛋白質(zhì)，如下所述。這些試劑盒中的每一個(gè)也可以一式三份（3X）提供。

常問問題

OptiPharma與OptiSol：我應(yīng)該得到哪一個(gè)？

OptiPharma試劑盒中的所有成分（緩沖液和添加劑）（3個(gè)對(duì)照孔除外）均為FDA批準(zhǔn)的藥物成分。如果您在藥物配方開發(fā)的任何階段都有藥物蛋白，OptiPharma就是其中之一。

OptiSol適用于各種類型的蛋白質(zhì)工作（例如制藥，工業(yè)，食品，植物，結(jié)晶工作）。OptiSol試劑盒中的大多數(shù)添加劑不適用于藥物配方。例如，如果您想要溶解粗蛋白質(zhì)混合物，OptiSol是一個(gè)很好的選擇。

我的聚合蛋白樣品是否會(huì)與OptiSol試劑一起“溶解”？

這取決于蛋白質(zhì)聚集體的性質(zhì)。找出答案的僅有方法是通過實(shí)驗(yàn)測(cè)試 - 這正是OptiSol蛋白質(zhì)溶解度篩選所做的。測(cè)試90種不同的溫和配方 - 不同的pH，鹽，聚合物，糖，多元醇，洗滌劑，還原劑。如果蛋白質(zhì)樣品可逆地聚集，OptiSol篩選器可能會(huì)產(chǎn)生溶解樣品的條件。

使用的配方相當(dāng)溫和。目標(biāo)是溶解聚集體并產(chǎn)生功能性蛋白質(zhì)。任何聚集的蛋白質(zhì)樣品都會(huì)溶解嗎？不，有些聚合物只含有“死”蛋白質(zhì)。對(duì)于這些頑固性樣品，您需要SDS或尿素，并獲得非功能性蛋白質(zhì)作為回報(bào)。

運(yùn)行OptiSol試劑盒需要多少蛋白質(zhì)？

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液與制劑混合時(shí)，蛋白質(zhì)濃度將在反應(yīng)板中稀釋11倍（15μL/165μL）。因此，必須從儲(chǔ)備蛋白質(zhì)溶液開始，該溶液是反應(yīng)板中終溶液濃度的11倍。約2 mL蛋白質(zhì)原液就足夠了。所需的蛋白質(zhì)濃度取決于蛋白質(zhì)的消光系數(shù)和蛋白質(zhì)檢測(cè)測(cè)定的靈敏度。在我們的實(shí)驗(yàn)室中，我們使用半寬UV 96孔板和UV / vis板讀數(shù)器開發(fā)了UV280方法。在我們的例子中，半寬UV280孔中的UV280吸光度必須至少約為0.4（吸光度單位）。

如何分析OptiSol實(shí)驗(yàn)的結(jié)果？

我們建議選擇敏感的蛋白質(zhì)檢測(cè)分析來表征濾液，優(yōu)選96孔格式。在大多數(shù)情況下，可以將平板讀數(shù)器數(shù)據(jù)直接復(fù)制并粘貼到Protein Dashboard™Excel電子表格中，以評(píng)估實(shí)驗(yàn)結(jié)果并獲得蛋白質(zhì)行為趨勢(shì)的圖形支持，并確定宜蛋白質(zhì)溶解的關(guān)鍵溶劑因子。可用于確定過濾溶液中蛋白質(zhì)的量或活性的診斷分析測(cè)試的實(shí)例。各種測(cè)定可以基于熒光或放射性的檢測(cè)（蛋白質(zhì)測(cè)定，酶測(cè)定，Western / ELISA，配體結(jié)合測(cè)定）。請(qǐng)注意，分析可能需要對(duì)OptiSol配方進(jìn)行補(bǔ)償，或者在OptiSol配方存在下可能無效。

哪種蛋白質(zhì)分析與OptiSol配合得很好？

任何具有足夠特異性，動(dòng)態(tài)范圍和靈敏度的蛋白質(zhì)測(cè)定。一些研究人員運(yùn)行點(diǎn)印跡（Western），一些具有熒光讀數(shù)，使用ELISA或使用酶活性測(cè)定。這取決于您，取決于您要篩選的內(nèi)容。

可以使用功能測(cè)定（測(cè)量結(jié)合或酶活性）或被動(dòng)測(cè)定（測(cè)量蛋白質(zhì)質(zhì)量）。

已經(jīng)使用純化蛋白質(zhì)樣品的幾個(gè)使用者已經(jīng)使用了Pierce BCA測(cè)定法及其'MICRO'變體。

實(shí)驗(yàn)需要多長(zhǎng)時(shí)間？

這在某種程度上取決于您的設(shè)置，但計(jì)劃運(yùn)行實(shí)驗(yàn)約3小時(shí)。

我可以使用OptiSol套件處理多少樣品/每個(gè)套件中有多少“運(yùn)行”？

OptiSol蛋白溶解度篩選試劑盒僅設(shè)計(jì)用于單一蛋白質(zhì)樣品。雖然我們已經(jīng)聽過多次成功使用過濾板的用戶，但我們不建議這樣做。多次使用終會(huì)阻塞過濾器并使結(jié)果不可靠。

蛋白質(zhì)儀表板如何幫助分析我的數(shù)據(jù)？

歡迎您使用任何想要繪制的工具并可視化您的OptiSol結(jié)果。Protein Dashboard是繪制pH與其他參數(shù)的依賴關(guān)系的快速方法。這有助于快速概述和詳細(xì)了解蛋白質(zhì)樣品的行為。

查看“數(shù)據(jù)分析”選項(xiàng)卡下的“蛋白質(zhì)儀表板”視頻。

OptiSol試劑的成分是什么？

OptiSol試劑由組合溶液組成，具有多種pH，緩沖液類型，帶電和中性有機(jī)添加劑和抗氧化劑。OpitSol手冊(cè)和Protein Dashboard中列出了所有組件的詳細(xì)列表。

什么是Solubilisin II？

Solubilisin II是一種專有技術(shù)解決方案，已被證明可以在很寬的pH值范圍內(nèi)促進(jìn)溶解度并保護(hù)蛋白質(zhì)免于聚集。

Solubilisin II可以用于體外PK研究嗎？

Solubilisin II尚未進(jìn)行體內(nèi)研究測(cè)試，僅應(yīng)用于體外研究。OptiSol試劑盒提供的一些試劑含有少量的sodium azide，因此與活細(xì)胞不相容。OptiSol試劑盒僅用于體外使用，不適用于細(xì)胞或動(dòng)物研究。

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