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            cytoskeleton BK165-S說明書

            更新時間:2019-02-18      點擊次數(shù):1779

             

            cytoskeleton BK165-S說明書

            新的Signal-Seeker™:PTM檢測試劑盒,抗體和試劑

            簡單 

            全面的套件可大限度地縮短優(yōu)化時間,同時大化PTM檢測

            質(zhì)量

            的靈敏度和度,可以自信地識別低豐度的PTM

            積分

            使用相同的系統(tǒng)研究多個PTM

             

            Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒
            (10次檢測)

            BK165-S

            Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒
            (30種檢測)

            BK165

            Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒
            (10次檢測)

            BK163-S

            Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒
            (30種檢測)

            BK163

            Signal-Seeker™磷酸酪氨酸檢測試劑盒
            (10種檢測)

            BK160-S

            Signal-Seeker™磷酸酪氨酸檢測試劑盒
            (30種檢測)

            BK160

            Signal-Seeker™SUMOylation 2/3檢測試劑盒
            (10種檢測)

            BK162-S

            Signal-Seeker™SUMOylation 2/3檢測試劑盒
            (30種檢測)

            BK162

            Signal-Seeker™泛素化檢測試劑盒
            (10種檢測)

            BK161-S

            Signal-Seeker™泛素化檢測試劑盒
            (30種檢測)

            BK161

             

             

             

            新的Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒(10種檢測)

            10種檢測方法(Cat。#BK165-S)

            Signal-Seeker™系列產(chǎn)品的開發(fā)旨在簡化專家和非專業(yè)人士對關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白修飾的分析。全面的Signal-Seeker™試劑盒提供親和珠系統(tǒng),可從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中分離和富集修飾的蛋白質(zhì)。然后使用針對靶蛋白的抗體通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。

             

            產(chǎn)品用途包括

            • 調(diào)查瞬態(tài)監(jiān)管機(jī)制
            • 測量多種途徑成員蛋白的信號傳導(dǎo)事件 
            • 發(fā)現(xiàn)您感興趣的蛋白質(zhì)的新修改
            • 深入了解監(jiān)管機(jī)制
            • 測量內(nèi)源性或瞬時表達(dá)的蛋白質(zhì)信號傳導(dǎo)事件

            ?

             

            套件內(nèi)容

            SUMOylation 1試劑盒包含以下組分:

            裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)清除步驟洗步驟洗脫步驟西部一步

             BlastR™裂解緩沖液 

             BlastR™稀釋緩沖液

             BlastR™過濾器

             蛋白酶抑制劑雞尾酒

             去SUMO化抑制劑雞尾酒

             Precision Red™蛋白質(zhì)分析試劑

             SUMOylation 1 Affinity Beads

             IP控制珠

             

             

             

             

             BlastR™洗滌緩沖液

             

             

             

             

             

             旋轉(zhuǎn)列

             珠子洗脫緩沖液

             

             

             

             

             化學(xué)發(fā)光試劑A.

             化學(xué)發(fā)光試劑B.

             抗SUMO1抗體

             

             

             

             

            示例結(jié)果

            這些套件有很多應(yīng)用,這里我們描述一個有趣的例子:

            應(yīng)用1:研究重要的SUMOylation 1事件

            與舊的SUMO1工具相比,使用Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒免疫沉淀總SUMO1譜

            (A)使用BlastR裂解和過濾系統(tǒng)獲得HAP1野生型(WT)或SUMO1敲除(KO)裂解物。將1mg每種裂解物與40mg每種SUMO1親和試劑一起溫育:ASM11-珠(Cytoskeleton),21C7(Invitrogen純化的),21C7(DSHB-上清液),D11-珠(Santa Cruz)和綴合的SUMO1 IgG對照珠。 (CIG03)。用蛋白G瓊脂糖珠捕獲21C7抗體以富集SUMO-1修飾的蛋白。通過SDS-PAGE分離樣品并轉(zhuǎn)移至PVDF。使用1:5000的ASM01(Cytoskeleton)抗體和5%牛奶中1:1000的小鼠Trubelot Ultra-HRP二抗,通過蛋白質(zhì)印跡分析富集的SUMO1樣品。Trueblot secondary用于小化21C7樣品的重鏈和輕鏈檢測。 

             

            (B):使用ASM11進(jìn)行IP,如圖1A所示。SUMO1修飾的蛋白質(zhì)用ASM01 1:5000顯示,抗小鼠以1:20,000顯示,以突出在64-30kDa范圍內(nèi)SUMO化蛋白質(zhì)的分布,當(dāng)使用未綴合的抗體時,可能被重鏈和輕鏈干擾掩蓋。 IP。

             

             

             

            與舊的SUMO1工具相比,使用Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測試劑盒免疫沉淀SUMO1修飾的靶蛋白

            使用BlastR裂解和過濾系統(tǒng)獲得HAP1野生型(WT)或SUMO1敲除(KO)裂解物。1毫克每裂解物與40孵育 ASM11珠(細(xì)胞骨架),21C7(DSHB上清液),和共軛SUMO1 IgG對照珠(CIG03):g各自SUMO1親和試劑的。用蛋白G瓊脂糖珠捕獲21C7抗體以富集SUMO-1修飾的蛋白。通過SDS-PAGE分離樣品并轉(zhuǎn)移至PVDF。靶蛋白:通過蛋白質(zhì)印跡分析(A)TFII-I,RanGAP1和(B)schmd1的SUMO1修飾形式。抗兔-HRP標(biāo)記的第二抗體以1:10,000使用。所有三種一抗均為兔多克隆抗體,不應(yīng)結(jié)合來自IP抗體的重鏈和輕鏈片段。

            在這一研究領(lǐng)域可以嘗試的其他實驗包括:

            •參與調(diào)節(jié)靶蛋白的SUMOylating和去SUMOylating酶的藥理學(xué)研究。

            •在各種不同的生長因子或藥物治療下研究SUMO化。

            •檢查SUMOylated靶蛋白與其下游效應(yīng)子的相互作用。

            •檢查SUMOylation 1和其他PTM之間對目標(biāo)蛋白的串?dāng)_。

             

            上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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