biozyme-inc PEPDAB010說明書

biozyme-inc PEPDAB010說明書

ADAM Substrate II (Fluorogenic) – PEPDAB010

ADAM底物II（熒光）– PEPDAB010

規(guī)格及用途

熒光底物：Dabcyl-SPLAQAVRSSK（5FAM）-NH 2

貨號：          PEPDAB010m001，1mg，125美元

貨號：          PEPDAB010m005，5mg，500美元

使用：

該熒光ADAM底物初由我們在出版物“用作ADAM9的高通量篩選工具的熒光底物”中進(jìn)行了描述。該ADAM底物基于前體TNF-α的切割序列，并已用于評估ADAM17在單細(xì)胞測定以及標(biāo)準(zhǔn)體外酶促和基于細(xì)胞的測定中的活性（請參見以下出版物）。有關(guān)該底物的底物特異性概況，請參見我們的產(chǎn)品表。該ADAM底材還是ADAM9和ADAM10的出色底材。該底物不是ADAM家族成員*的，因為它也可以被蛋白酶MMP家族的成員加工。BioZyme Inc確實為ADAM或MMP系列成員出售特定的底材（請參閱我們的產(chǎn)品說明書或目錄，用于底物特異性概況）。它顯示出對所有這些酶的相當(dāng)強(qiáng)的活性，特異性常數(shù)k cat / K m（M -1 s -1），范圍從大約4 x 10 3  到4 x 10 5。通常，將肽溶解在DMSO中制成濃度約為10mM的儲備溶液。當(dāng)用于體外測定時，底物通常以約10uM的濃度使用。切記將終反應(yīng)中的DMSO濃度保持在1％或以下，以避免DMSO對反應(yīng)的影響，并切記在背景孔中有相當(dāng)百分比的DMSO。為了與ADAM系列成員一起使用，緩沖液應(yīng)由25mM Tris，pH 8、10mM CaCl 2和6 x 10 -4 Brij洗滌劑組成。為了與蛋白酶的使用，緩沖應(yīng)含有的50mM Tris，pH 7.5中，150mM NaCl的，2毫米氯化鈣2，5μM的ZnSO 4，和0.01％的Brij-35。激發(fā)和發(fā)射波長分別為485和530 nm。

分子量：

1751.9克/摩爾

純度：

通過HPLC和質(zhì)譜評估大于92％。

溶解度：

含10％甲酸的水中1 mg / ml

出現(xiàn)：

紅色凍干粉

運輸：

肽粉在室溫下運輸。

存儲：

收到后，應(yīng)將肽儲存在-70 oC。避免重復(fù)凍融循環(huán)。如果溶解在液體（例如DMSO）中，請分裝到單獨的試管中，以一定程度地減少凍融循環(huán)次數(shù)。

穩(wěn)定性：

樣品在-70 o C下可穩(wěn)定長達(dá)6個月。

參考文獻(xiàn)：

1.熒光底物可用作ADAM9的高通量篩選工具。Marcia L Moss，F(xiàn)red H Rasmussen，Raphael Nudelman，Peter J Dempsey，Jason Williams 組合化學(xué)與高通量篩選12/2009; 13（4）：358-65。

2.用于同時測定多種蛋白酶活性的蛋白水解活性矩陣分析（PrAMA）。 Miles A Miller，Layla Barkal，Karen Jeng，Andreas Herrlich，Marcia Moss，Linda G Griffith，Douglas A Lauffenburger綜合生物學(xué)12/2010; 3（4）：422-38。

3.高通量蛋白酶活性細(xì)胞計數(shù)法顯示PMA介導(dǎo)的ADAM17激活具有劑量依賴性異質(zhì)性。 Wu L等。整合生物學(xué)（Camb）。2015年5月； 7（5）：513-24。doi：10.1039 / c5ib00019j。