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nanohelix Premier 2x qPCR Mix說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間：2022-05-25 點(diǎn)擊次數(shù)：5285

Premier 2x qPCR Mix [綠色]

方便的 2x 濃縮預(yù)混液
盡量減少引物二聚體的形成
快速、特異、靈敏、可靠
*的緩沖系統(tǒng)和抗體介導(dǎo)的熱啟動(dòng)酶
可選包含 ROX 參考染料和 UDG 系統(tǒng)
方便并降低污染風(fēng)險(xiǎn)

產(chǎn)品

貨號(hào)	產(chǎn)品	特征
nanohelix BPQ	Premier 2x qPCR Mix [綠色]	-
nanohelix BPQU	Premier 2x qPCR Mix [綠色] w/ UDG	+ UDG 系統(tǒng)*

Premier 2x qPCR Mix [綠色]旨在對(duì)目標(biāo) DNA 進(jìn)行快速、高度特異性和靈敏的實(shí)時(shí)定量。專門(mén)設(shè)計(jì)的緩沖液和抗體介導(dǎo)的熱啟動(dòng)酶可顯著減少引物二聚體的形成并確保數(shù)據(jù)可靠。方便的 2x 濃縮預(yù)混物包含Ab+Taq聚合酶、dNTP、緩沖液、Mg 2+、綠色熒光染料和穩(wěn)定劑。使用UDG /dUTP 預(yù)混液 (BPQU)可以去除殘留污染的 PCR 產(chǎn)物。

應(yīng)用

目標(biāo) DNA 的實(shí)時(shí)定量
自動(dòng)高通量實(shí)時(shí) PCR
cDNA的基因表達(dá)分析
SNP分析和基因分型
微生物和病毒病原體檢測(cè)
分子診斷

圖 1. 使用 Premier 2X qPCR Mix [綠色]（= RealHelix ™ Premier qPCR Mix [綠色]）進(jìn)行靈敏檢測(cè)。使用 Premier 2X qPCR Mix [Green] 分析 10 倍系列稀釋的基因組 DNA 作為標(biāo)準(zhǔn)樣品，用于人葡萄糖 6-磷酸脫氫酶基因特異性引物組。使用 Premier 2X qPCR Mix [綠色] 進(jìn)行實(shí)時(shí) PCR 的準(zhǔn)確性由 R2 值=0.99887 證明。NTC：陰性對(duì)照。

圖 2. 使用 Premier 2X qPCR Mix [Green] （= RealHelix™ Premier qPCR Mix [Green]）iTaq Universal SYBR green supermix（公司 B）和 TOPreal qPCR 2x premix（公司 E）的實(shí)時(shí) PCR 比較。使用人 HPRT-1 基因特異性引物組分析來(lái)自全血的 10 倍系列稀釋的人基因組 DNA（紅色：50 ng/rxn，綠色：5 ng/rxn，藍(lán)色：0.5 ng/rxn）。R2 證明了實(shí)時(shí) PCR 的準(zhǔn)確性 value=0.99482 (Premier qPCR Mix), R2值=0.98909（iTaq Universal SYBR green supermix）和 R2值 = 0.99233（TOPreal qPCR 2x 預(yù)混物）。反應(yīng)在實(shí)時(shí) PCR 儀器 Rotor-GENE Q (QIAGEN, Germany) 上進(jìn)行。

圖 3. 使用 Premier 2X qPCR Mix [Green] （= RealHelix™ Premier qPCR Mix [Green]） iTaq Universal SYBR green supermix（公司 B）和 TOPreal qPCR 2x premix（公司 E）的實(shí)時(shí) PCR 比較。使用人 HPRT-1 基因特異性引物組分析來(lái)自全血的 10 倍系列稀釋的人基因組 DNA（紅色：50 ng/rxn，綠色：5 ng/rxn，藍(lán)色：0.5 ng/rxn）。R2 證明了實(shí)時(shí) PCR 的準(zhǔn)確性值=0.999（RealHelix™ Premier qPCR Mix [綠色]），R2值=0.999（iTaq Universal SYBR green supermix）和 R2值 = 1.000（TOPreal qPCR 2x 預(yù)混物）。熔解曲線分析顯示 Premier qPCR Mix 的高特異性。反應(yīng)在實(shí)時(shí) PCR 儀器 CFX-96 (Bio-Rad, USA) 上進(jìn)行。NTC：陰性對(duì)照。

圖 4. 使用Premier 2X qPCR Mix [Green] （= RealHelix™ Premier qPCR Mix [Green]）擴(kuò)增具有不同 G+C 含量的靶 DNA 。Premier 2X qPCR Mix [綠色] 使用 10 倍連續(xù)稀釋的人類基因組 DNA（紅色：50 ng/rxn，綠色：5 ng/rxn，藍(lán)色：0.5 ng/rxn）和 Rotor-Gene Q 進(jìn)行實(shí)時(shí) PCR 評(píng)估儀器（QIAGEN，德國(guó)）、CFX-96 儀器（Bio-Rad，美國(guó)）和 ABI7500 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 系統(tǒng)（Applied Biosystems，美國(guó)）。NTC：陰性對(duì)照。

屬性：實(shí)時(shí)熒光定量 PCR，嵌入劑類型，熱啟動(dòng)

熱活化： +95°C 2 分鐘

活性測(cè)試：使用 Bio-Rad CFX-96（人類基因組 DNA，G6PDH 片段）進(jìn)行 PCR 性能測(cè)試：符合規(guī)范

穩(wěn)定性： -20°C 下 12 個(gè)月

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