ComplementTech C3 蛋白說明書

名稱： C3蛋白

編號： A113

規(guī)格： 250 µg/vial

濃度： 1.0 mg/mL (實(shí)際濃度見分析證書)

類型 冷凍液體

活動： >值為70%，與正常人血清標(biāo)準(zhǔn)相比 (見分析證書) 。

純度： >95%由SDS-PAGE

緩沖區(qū)： 10 mM磷酸鈉，145 mM氯化鈉，pH 7.2

消缺系數(shù)。 A280 nm在1.0 mg/mL時(shí)的=為1.03

分子量： 185000Da (2鏈)

防腐劑： 無，0.22µm過濾

存儲： - 7 0oC或以下。避免凍融 (>每次解凍活性損失10%) 。

根源 正常的人類血清 (經(jīng)認(rèn)證的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗體檢測均為陰性) 。

預(yù)防措施 在處理人體血液制品時(shí)要采取常規(guī)的預(yù)防措施。

一般說明

人類天然的C3是一種天然的糖基化 (~2.7%) 多肽，包含兩條二硫鍵連接的鏈 。C3是補(bǔ)體激活的所有三種途徑的激活的核心(Law，S。K.A.和里德，K。B. M. (1995)).每個(gè)途徑的起始都產(chǎn)生與目標(biāo)表面結(jié)合的蛋白水解酶復(fù)合物 (C3轉(zhuǎn)化酶 ) 。這些酶在C3中切割一個(gè)肽鍵，釋放過敏性毒素C3a并激活C3b。在很短的一段時(shí)間 內(nèi) (~60µs) ，這種新生的C3b能夠與目標(biāo)表面的羥基發(fā)生反應(yīng)并共價(jià)偶聯(lián)。碳水化合 物是shou選的目標(biāo)，但蛋白質(zhì)的羥基和氨基也會發(fā)生反應(yīng)。這種用C3b標(biāo)記目標(biāo)表面的過 程被稱為調(diào)理作用。新生C3b的反應(yīng)位點(diǎn)是硫酯(Tack B。J.等人。 (1980); Pangburn M.K.和穆勒-EberhardH。J. (1980) )，C3b通過共價(jià)酯鍵與目標(biāo)相連 (如果C3b附著在 氨基上，則形成酰胺鍵) 。大多數(shù)在補(bǔ)體激活過程中被激活的C3永遠(yuǎn)不會附著在表面 ，因?yàn)樗牧蝓ヅc形成水的流體相C3b反應(yīng)，而C3b被H和形成iC3b的因子迅速失活。表 面結(jié)合的C3b在所有三個(gè)途徑中對于有效激活C5和C5b-9復(fù)合物的形成都是必需的。表 面結(jié)合的C3b及其分解產(chǎn)物iC3b和C3d被淋巴細(xì)胞和吞噬細(xì)胞上的許多受體識別，這些 受體使用C3b配體刺激抗原呈遞給適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞。最終的結(jié)果是目標(biāo)特異性b 細(xì)胞和t細(xì)胞群體的擴(kuò)大。

物理特性和結(jié)構(gòu)

分子量：18.5萬道爾頓， 由兩條二硫鍵連接的鏈組成。阿爾法鏈?zhǔn)?10000道爾 頓 (包含C3a和C3d域) ，測試鏈?zhǔn)?5000道爾頓。阿爾法鏈和阿爾法鏈?zhǔn)峭ㄟ^一個(gè)二硫 鍵連接起來的。C3的pI約為。5.9

C3被C3轉(zhuǎn)化酶切割后，C3a (77個(gè)氨基酸片段，9083 Da) 從alpha鏈的n端釋 放出來，C3b (176,000 Da) 變成共價(jià)附著在活化劑表面的。C3和C3b的晶體衍生結(jié)構(gòu)均已被描述(Gros，P。 (2008) ) ，這些結(jié)果表明，在C3a- C3b肽鍵被裂解后，C3的C3b部分發(fā)生了很大的構(gòu)象變化。

天然的C3和C4在血漿中循環(huán)，通過分子內(nèi)硫酯鍵連接其C3d或C4d結(jié)構(gòu)域中的 甘氨酸和谷氨酰胺殘基。這些硫酯鍵容易受到氨、 甲胺、羥胺和聯(lián)胺等氨的親零攻擊 ，所有這些胺都已被用于滅活補(bǔ)體。

功能

C3對于有效的補(bǔ)體激活和隨后的抗原呈現(xiàn)給適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞至關(guān)重要 (Lambris，J。D. (1988)).在識別目標(biāo)補(bǔ)體后，被三種補(bǔ)體途徑中的一種激活，并在 目標(biāo)表面形成酶 (C3轉(zhuǎn)化酶) 。這些酶 (C4b、C2a或C3b、Bb) 在阿爾法鏈的Arg 77后 切割C3，釋放過敏性毒素C3a并將C3b沉積在目標(biāo)表面。雖然有一個(gè)非常弱的C3旁路系 統(tǒng)通過經(jīng)典和凝集素途徑運(yùn)作 (C4b，C2a可以在沒有C3b的情況下激活C3b的102000) ，C3b是有效C5激活所必需的(Rawal N。和潘伯恩M。K. (2003)).純化的c3對凍融極為敏感，在每個(gè)凍融循環(huán)中損失510%的活性。它對諸如-20 等中間溫度也很敏感oC.它在中等溫度下停留的時(shí)間越長，失去的活性就越多。幾個(gè) 小時(shí)oC可以wan全滅活它，即使它仍然被wan全凍結(jié)。